Статьи и публикации

Случай диагностики болезни Андерсона-Фабри
Случай болезни Фабри у взрослого глазами кардиолога и генетика
Поражение сердца при болезни Фабри: как заподозрить, диагностировать и лечить?

Биохимическая и генетическая диагностика БФ

Диагноз БФ у лиц мужского пола подтверждается биохимическими методами – определение активности фермента α-галактозидазы А. Снижение активности фермента наблюдается в плазме, лейкоцитах, сыворотке крови, слезной жидкости, в любом биоптате или культуре клеток кожных фибробластов (Beutler & Kuhl, 1972; Desnick et al.,1973; Ho et al., 1972; Johnson et al., 1975; Mayers et al., 1981; Wood & Nadler, 1972). Для проведения анализа применяют синтетические субстраты для α-галактозидазы А и добавляют N-ацетилгалактозамин – ингибитор активности α-галактозидазы В (Mayers et al., 1981). При классической форме БФ у лиц мужского пола выявляют очень низкую, близкую к нулевой, ферментативную активность α-галактозидазы А, при БФ с поражением одной системы или органа может наблюдаться высокая остаточная активность данного фермента. Кроме того, снижение активности α-галактозидазы А может наблюдаться и в норме, в следствии присутствия аллеля псевдонедостаточности (Froissart et al., 2003; Yasuda et al., 2003). Следовательно, для подтверждения диагноза очень важным является обнаружение мутации в гене GLA.

У гетерозиготных носительниц БФ биохимический метод для установления диагноза не является надежным, поскольку у пораженных женщин активность фермента может быть очень низкой, как и у больных мужчин, так и иметь нормальные значения. Таким образом, ДНК-диагностика крайне необходима для определения гетерозиготного носительства.

Крупные генные перестройки выявляют саузерн-блот гибридизацией (Bernstein et al., 1989) или методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (Kornreich & Desnick, 1993). Однонуклеотидные замены, небольшие делеции, инсерции обнаруживают методом анализа конформационного полиморфизма одноцепочечной ДНК (Davies et al., 1993),
методом мисматч с флуоресцентной меткой (German et al., 1996) или денатурацией с высоко разрешающей жидкостной хроматографией (Rolfs et al., 2005; Shabbeer et al., 2005). Выявленные в процессе этого первичного «скрининга» изменения подтверждают прямым секвенированием образцов.

При выявлении повышенного уровня Gb3 в моче и крови диагноз БФ может быть заподозрен, однако этот параметр не рекомендуют использовать для диагностики, так как у больных с поражением одной системы или органа этот показатель может быть в норме, и он не является надежным тестом для женщин с классической формой БФ (Kitagawa et al., 2005; Young et al., 2005).